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hnRNP K異質性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒

產品簡介

hnRNP K異質性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒公司正在銷售的產品:phospho-c-Raf (Ser289) /FITC 熒光標記化原癌因c-Raf抗體IgG
phospho-c-Raf (Ser259)/FITC 熒光標記化原癌因c-Raf抗體IgG
phospho-c-Raf (Ser296) /FITC 熒光標記化原癌因c-Raf抗體IgG
phospho-c-Raf (Ser

更新時間:2022-05-26
訪問次數:852
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樣本實驗前準備:

ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

1)血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2)血漿:

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

3)尿液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4)細胞培養上清:

檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

5)培養細胞

檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

6)組織標本

切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

產品屬性:

產品名稱

hnRNP K異質性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒

英文名稱

hnRNP K ELISA Kit

產品規格

48T/96T

產品貨號

LZ-E028693


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檢測程序:

1.  加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

操作步驟:

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

標本要求:

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

需要而未提供的試劑和器材:

1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器

6. 蒸餾水,容量瓶等。

備試劑與收集血樣:

1.  收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復凍融。

2.  標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒beta-香樹精鋅標準溶液2.0mg/l,分析標準品,水質分析 三乙三氫氟鹽  97%

血栓調節蛋白(TM)試劑盒β-胸鋅 CP,99%疊氮化四丁銨  95%

血栓調節蛋白(TM)試劑盒Beta-育亨賓鋅粉 AR,99%十二烷硫鈉 CP

纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒Corylifol A鋅 AR,99%十二烷硫鈉 Ph. Eur,USP級,92%

纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒D(+)-阿拉伯糖鋅粉 SP十二烷硫鈉 AR,92.5-100.5%

血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒De-O-乙酰香蘭色烯鋅粒 SP十二烷硫鈉 97%,電泳

血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒Ent-14,16-環氧-8-海松烯-3,15-二對氨苯乙 98%十二烷硫鈉 99.0%,超純級

血小板反應蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 Ent-3-氧代貝殼烯烷-16,17-二苯酰 98%十二烷硫鈉 ACS

血小板反應蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 L-焦谷氨酯2,4-二氟溴苯 98%十二烷硫鈉 分子生物學級,≥98.5% (GC)

血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒Momor-腦脂I2--6-氟苯 98%十二烷硫鈉 離子對色譜級,≥99.0% (GC)

血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒N1,N10-雙(對香豆酰)亞精3,5-二氟苯 97%橙花   97%

末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒 N-對反式香豆酰酪3-磺酰 97%丁位辛內酯  98%

末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒 N-反式-阿魏酰低聚糖-3-氧酪苯 99%3-苯 99%

補體蛋白4(C4)試劑盒N-反式阿魏酰酪對叔丁苯  95%3-苯 ≥98%, FCC

補體蛋白4(C4)試劑盒N-瓜馥木烯三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 穩定劑,98%二亞砜 for HPLC, ≥99.7%

補體蛋白3(C3)試劑盒 O-beta-D-吡喃葡萄糖對乙烯苯酯2,2,2-三氟乙 99.5% CP,98.0%
hnRNP K異質性胞核核糖核蛋白KELISA試劑盒細胞膜染色試劑盒是用一種親脂性的橙色熒光探針進行細胞膜染色。染色液I 進入細胞膜后,在整個細胞膜上擴散,佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液I在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,被激發后可以發出橙色的熒光,具有很高的淬滅常數和激發態壽命。

染色液I 通常不會明顯影響細胞的活力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。

儲存條件:4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。

有效期:六個月。



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